显微镜的分辨本领随波长的减小而提高,随数值孔径的增大而提高。
显微镜的放大率是否越大越好?用显微镜可以看清怎样细小的细节? 如果不能被显微镜分辨导致眼睛不能分辨,放得再大也没有用,称无效放大。 显微镜能分辨而眼睛不能分辨,称为放大不足。
数值孔径要与放大率要匹配,如最大的数值孔径取1.5的话,显微镜的最高有效放大率为1500倍。 由于显微镜要求分辨率高,则数值孔径A大,放大率要与之相适应,因而物镜的放大率也要相应匹配,并在规定机械筒长下使用(例如,160mm)。生物显微镜的标本放在载玻片上,上面盖上盖玻片,在设计时必须考虑盖玻片。物镜的参数标明在外壳上。随着放大倍数由低到高,其结构也相应复杂。低倍物镜可以用双胶合,中倍物镜用双双胶合,高倍物镜用双胶合+前片,数值孔径更大的阿贝物镜则需要浸油。
显微镜的照明系统
对于不发光的透明物面,采用透射光照明,有临界照明和柯拉照明两种。 光源通过聚光镜与物面共轭,聚光镜前焦面上的可变光阑与显微物镜后焦面上的孔径光阑共轭。 照明系统应满足:聚光镜的像方孔径角大于等于显微物镜的物方孔径角。 由于光源像通过聚光镜成在物面上,临界照明是一种不均匀照明,柯拉照明是一种均匀照明。
物面不发光、不透明时,需要利用反射、散射光照明。可以采用斜照明,主要利用散射光,规则反射光不能进入视场。也可采用垂直照明,这时物镜同时起聚光镜作用,也分为临界照明和柯拉照明两种。如果要观察小于分辨极限的微小质点,应采用暗视场照明。
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